細胞培養過程中,由于實驗環境、操作者鼻腔口腔、實驗器材等很多地方都有支原體的存在。因此,細胞發生支原體污染的頻率很高。據美國數據統計,細胞發生支原體污染的幾率在70%以上。
同時,由于支原體直徑很小,僅在180nm~350nm之間,只有通過電鏡才能看到。因此,支原體污染不易被實驗者肉眼發覺。而支原體污染是個循序的過程,普通抗生素對其無效。因此,被支原體污染的細胞會持續受到影響,導致實驗數據不準確。
之前我們說過兩種檢測方法:支原體常規PCR法和支原體檢測qPCR,今天介紹的是:支原體檢測方法之培養法
它的原理:從可疑的細胞培養體系中取樣,接種到適宜支原體生長的瓊脂平板上。如果樣本中含有支原體,它們就會在這種瓊脂平板上瘋kuang生長,最終形成明顯可見的特征性菌落。
它的優點:在選用合適培養基以及合規要求操作下,這種方法很少會出現假陰性結果,檢測精確度很高,因此被譽為支原體檢測金標準。
它的缺點也比較明顯,操作時間太長,至少30天才能出結果,滿足不了大多數質檢部門的要求。無法檢測出死亡的支原體。