1981年Kaufman等人[1]直接從小鼠囊胚的ICM 中成功獲得多潛能的胚胎干細胞(ES細胞)以來,自此之后,人們先后從豬、牛、兔等動物體內,分離得到ES細胞或類ES細胞系。
隨后的研究中,Thomsom 等人[2]建立了人類胚胎細胞系,科學家們開始關注于胚胎細胞的定向誘導分化,希望通過這類研究為治療退行性疾病提供組織、器GUAN移植的原材料。顯然,干細胞的體外培養是進行上述各項研究的前提與基礎。在干細胞的體外培養方面,培養基是其賴以生存的環境,哪怕是極微小的變化都會影響干細胞的增殖和分化[3]。
在隨后的研究中,科研人員發現,干細胞具有兩個特性:自我更新的能力以及多向分化的潛能。在體外培養時,實驗人員需要盡可能利用各種培養條件,維持干細胞的這兩大特性。因此要求ES細胞培養基中,除了一般體外培養所用到的基礎培養基,還應添加血清、LIF、β-巰基乙醇,L-谷氨酰胺等成分,隨后有發展出飼養層培養等方法,各種干細胞專用培養基、條件培養基也相繼問世[4],豐富了干細胞培養方法與流程。
但目前市場上,干細胞培養專用的試劑盒,其中培養基和細胞因子價格高昂,使得培養成本大大增加,而且實際操作過程往往需要配合飼養層來培養,周期長,步驟繁瑣,對實驗者有較高的技術要求,因此很多實驗室培養干細胞的效果并不理想。
參考文獻:
[1] Evans M J,Kaufman M H.Establishment in culture of plurpotential cells from mouse embryos [J].Nature, 1981,292:154-156.
[2] T homson J A,Itskovits-elder J S,Shapiro S S,et al. Embryonic stem cell lines derived from human blastocysts[J].Science,1998,282(5391) :1145-1148.
[3] 楊 奇.胚胎干細胞的分離克隆[J].西北農林科技大 學學報( 自然科學版) ,2001,29(3) :120-124.
[4] 郭志林,王新莊,衛 木,等.影響昆明小鼠和 BALB/c 小鼠胚胎干細胞分離、克隆、傳代的若干因素[J].中 國獸醫學報,2006,26(4) :448-450.